聚丙烯酰胺凝胶电泳直接化学发光成像法分离和检测血液红细胞中的HbA0,HbA1,HbA2和HbF

化学学报 ›› 2004, Vol. 62 ›› Issue (14): 1327-1332. 上一篇下一篇

聚丙烯酰胺凝胶电泳直接化学发光成像法分离和检测血液红细胞中的HbA₀,HbA₁,HbA₂和HbF

申素辉¹, 翟所迪², 欧阳津¹, 张现化¹, 张会英³

1. 北京师范大学化学系, 北京, 100875;
2. 北京大学第三医院, 北京, 100083;
3. 北京积水潭医院, 北京, 100035

投稿日期:2003-10-10 修回日期:2004-03-04 发布日期:2014-02-17
通讯作者: 欧阳津,E-mail:jinoyang@bnu.edu.cn;Fax:010-62799838 E-mail:jinoyang@bnu.edu.cn
基金资助:
国家自然科学基金(No.20375005)资助项目.

Direct Chemiluminescent Imaging Method Used to Detect HbA₀, HbA₁, HbA₂ and HbF in Human Erythrocyte Separated by Polyacrylamide Gel Electrophoresis

SHEN Su-Hui¹, ZHAI Suo-Di², OUYANG Jin¹, ZHANG Xian-Hua¹, ZHANG Hui-Ying³

1. Department of Chemistry, Beijing Normal University, Beijing 100875;
2. The Third Hospital of Peking University, Beijing 100083;
3. Beijing Jishuitan Hospital, Beijing 100875

Received:2003-10-10 Revised:2004-03-04 Published:2014-02-17

文章分享

摘要/Abstract

建立了聚丙烯酰胺凝胶电泳直接化学发光成像分离和检测蛋白质的新方法.应用本方法分离和检测了新生儿脐带血和正常成年人血液红细胞中的不同血红蛋白HbA₀,HbA₁,HbA₂和HbF,并与传统的考马斯亮兰染色法进行了比较,结果表明,本方法灵敏度高、背景低,步骤简单、快速,可以在10min内得到检测结果.此外,我们还以血红蛋白作为探针,检测了人血清蛋白,研究了人血清白蛋白对血红蛋白电泳结果的影响,并优化了发光成像的各种条件.

关键词: 直接化学发光成像法, 聚丙烯酰胺凝胶电泳, 血红蛋白

A new method of direct chemiluminescent imaging to detect proteins separated by polyacrylamide gel eletrophoresis was established.This method has been applied to the separation and detection of hemoglobins in erythrocyte of healthy voluntary people and umbilical cord blood.Serum proteins were also detected using hemoglobin as probe.Compared with the traditional Coomassie brilliant blue R250 stain method, direct chemiluminescent imaging offers a fast, convenient and inexpensive method with high sensitivity and selectivity.Furthermore, the effect of human serum albumin on the electrophoretic result of the hemoglobin was studied.The chemiluminescent imaging conditions have been optimized in the experiment.

Key words: direct chemiluminescent imaging, polyacrylamide gel electrophoresis, hemoglobin

引用此文

申素辉, 翟所迪, 欧阳津, 张现化, 张会英. 聚丙烯酰胺凝胶电泳直接化学发光成像法分离和检测血液红细胞中的HbA₀,HbA₁,HbA₂和HbF[J]. 化学学报, 2004, 62(14): 1327-1332.

SHEN Su-Hui, ZHAI Suo-Di, OUYANG Jin, ZHANG Xian-Hua, ZHANG Hui-Ying. Direct Chemiluminescent Imaging Method Used to Detect HbA₀, HbA₁, HbA₂ and HbF in Human Erythrocyte Separated by Polyacrylamide Gel Electrophoresis[J]. Acta Chimica Sinica, 2004, 62(14): 1327-1332.

导出引用 EndNote|Reference Manager|ProCite|BibTeX|RefWorks

分享此文

参考文献

[1] Wang, Q.-L.; Liu, Z.-H.; Yuan, H.; Cai, R.-X. Chin. J. Anal Chem. 2001, 29(4), 421 (in Chinese).(王全林,刘志洪,原弘,蔡汝秀,分析化学,2001,29(4),421. )
[2] Information Laboratory, No. 126 Institute, Public Security Ministry, New Technology Abroad to Test Blood Type, Qunzhong Press, Beijing, 1984, pp. 141 ～ 148 (in Chinese).(公安部126研究所情报资料室,国外血型检验新技术,群众出版社,北京,1984,pp.141～148.)
[3] Liang, Z.-Y. Physiological Chemistry, Shanghai Science and Technology Press, Shanghai, 1990, pp. 48～ 52 (in Chinese).(粱之彦,生理化学,上海科学技术出版社,上海,1990,pp. 48～52.)
[4] He, Z.-X; Zhang, S.-Z. Electrophoresis, Science Press, Beijing, 1999 (in Chinese).(何忠效,张树政,电泳,科学出版社,北京,1999.)
[5] Switzer, R. C.; Merril, C. R.; Shifrin, S. Anal. Biochem. 1979, 98, 231.
[6] Kotani, E.; Sugimoto, M.; Kamata, H.; Fujii, N.; Saitoh, M.; Usuki, S.; Kubo, T.; Song, K.; Miyazaki, M.;Murakami, K.; Miyazaki, H. Am. J. Physiol. 1999, 276, E25.
[7] Schramm, R. D.; Bavister, B. D. Biol. Reprod. 1999, 60, 721.
[8] Robinson, R. S.; Mann, G. E.; Lamming, G. E.; Wathes, D. C. Endocrinology 1999, 160, 21.
[9] Liu, R.; Huang, J.-Y.; Liu, T.-S. J. Tianjin Agric. College 1999, 6(2), 5 (in Chinese).(柳荣,黄剑英,刘田生,天津农学院学报,1999,6(2),5.)
[10] Smejkal, G. B.; Shainoff, J. R.; Yakubenko, A. V. Electrophoresis 2002, 23, 979.
[11] Gao, L.-Y. Chin. J. QinghaiAnim. Vet. Sci. 2001, 31(1),10 (in Chinese).(高丽英,青海畜牧兽医杂志,2001,31(1),10.)
[12] Rex, M.; Robert, L. D.; Thomas, W. C. Biochemistry, Translated by Xu, X.-L. People's Health Press, Beijing, 1988, pp. 64 ～ 69 (in Chinese).(Rex, M.; Robert, L. D.; Thomas, W. C., 生物化学, 徐晓利译,人民卫生出版社,北京,1988,pp.64～69.)
[13] Yu, Z.-F. Hematology of Modern Times, Zhejiang Science andTechnolygy Press, Hangzhou, 1989, pp. 147～ 148 (in Chinese).(郁知非,现代血液病学,浙江科学技术出版社,杭州,1989, pp. 147 ～ 148. )
[14] Ci, Y. X.; Tie, J. K.; Wang, Q. W.; Chang, W. B. AnalChim. Acta 1992, 269, 109.

[1]	刘亭廷, 彭程, 马云川, 欧阳津. 碳量子点荧光成像法应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳检测人血清蛋白质的研究[J]. 化学学报, 2013, 71(06): 962-966.
[2]	赵越, 洪波, 范楼珍. 三维金纳米团簇/多壁碳纳米管-Nafion膜修饰电极的电化学制备及血红蛋白的直接电化学[J]. 化学学报, 2013, 71(02): 239-245.
[3]	郑静, 赵家昌, 龚晨, 刘萍, 陈瑜, 黄焕, 何品刚, 方禹之. 有序中孔炭/四氧化三铁复合材料的制备及其用于血红蛋白的电化学研究[J]. 化学学报, 2012, 0(05): 617-623 .
[4]	刘勇, 王荣, 高岚, 贾正平, 谢华, 张军莉, 马骏, 张爱梅, 谢希晖. 毛细管电泳检测肺癌及癌旁正常组织蛋白质混合物差异[J]. 化学学报, 2011, 69(05): 543-547.
[5]	李燕, 高艳芳, 刘俞辰, 周宇, 刘进荣. 血红蛋白在二氧化铈修饰电极上的直接电化学[J]. 化学学报, 2010, 68(12): 1161-1166.
[6]	武五爱,郭满栋,尹志芬,尉景瑞,李婧芳,李君,张宇. 血红蛋白在纳米孔径氧化铝膜修饰电极上的直接电化学[J]. 化学学报, 2009, 67(8): 781-785.
[7]	马林,魏志强,黄爱民,杨华,何维仁,林瑞森. 丙三醇对水溶液中血红蛋白构象的影响——荧光猝灭和动态光散射研究[J]. 化学学报, 2009, 67(14): 1566-1572.
[8]	卢雁,王公轲,张玮玮. 运用离子选择性电极研究氟离子与蛋白质的相互作用[J]. 化学学报, 2008, 66(1): 10-14.
[9]	刘秋叶,李文友,何锡文,陈朗星,张玉奎. 修饰硅胶表面印迹牛血红蛋白及其识别性能的研究[J]. 化学学报, 2008, 66(1): 56-62.
[10]	沈星灿,刘新艳,梁宏,卢昕. 牛血红蛋白与银纳米粒子相互作用的光谱研究[J]. 化学学报, 2006, 64(6): 469-474.
[11]	周丽绘, 鲜跃仲, 周宇艳, 胡军, 刘洪来. 金复合介孔SBA-15吸附血红蛋白在H₂O₂电催化反应中的应用[J]. 化学学报, 2005, 63(23): 2117-2120.
[12]	李平,刘梅川,张成林,程欲晓,张莉,金利通. 聚乙烯吡咯烷酮/硫化镉量子点修饰电极的制备及其对血红蛋白的测定研究[J]. 化学学报, 2005, 63(12): 1075-1080.
[13]	胡兴,张裕英,李成海,刘慧宏,邹国林. 血红蛋白生物催化合成导电聚苯胺[J]. 化学学报, 2005, 63(1): 33-38.
[14]	王全林,刘志洪,蔡汝秀,吕功煊. 血红蛋白的过氧化物酶催化特性研究[J]. 化学学报, 2003, 61(1): 34-39.
[15]	金松子,王韬,张春煦,沈含熙. 血红蛋白在磷脂-月桂酸修饰的玻碳电极上的电化学行为及其分析应用[J]. 化学学报, 2002, 60(7): 1269-1273.

聚丙烯酰胺凝胶电泳直接化学发光成像法分离和检测血液红细胞中的HbA₀,HbA₁,HbA₂和HbF

Direct Chemiluminescent Imaging Method Used to Detect HbA₀, HbA₁, HbA₂ and HbF in Human Erythrocyte Separated by Polyacrylamide Gel Electrophoresis

PDF

可视化

摘要/Abstract

引用此文

分享此文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

相关统计

本文评价