化学学报 ›› 2006, Vol. 64 ›› Issue (11): 1116-1120. 上一篇 下一篇
研究论文
何丽芳1,2,唐红星1,2,王柯敏*,1,2,3,谭蔚泓1,2,3, 刘斌2,3,孟祥贤2,3,李军1,2,3,王炜1,2<
HE Li-Fang1,2, TANG Hong-Xing1,2, WANG Ke-Min*,1,2,c,TAN Wei-Hong1,2,c, LIU Bin2,c, MENG Xiang-Xian2,c, LI Jun1,2,c, WANG Wei1,
根据p53基因的序列设计并合成了能特异性检测p53 mRNA的分子信标(MB), 发展了一种快速定量测定细胞内总RNA提取物中p53 mRNA的方法. 采用鼻咽癌(CNE2)细胞系和经RNA干扰技术降低p53基因表达的CNE2-p53RNAi细胞系, 抽提总RNA并用MB检测, 验证了MB的检测对象是p53 mRNA. 将该方法应用于多种肿瘤细胞内p53基因表达水平的分析, 表达变化趋势与经典的mRNA分析方法RT-PCR检测结果相符. 在此基础上, 用MB对5-氟尿嘧啶(5-Fu)处理的肺腺癌细胞(A549)进行了p53 mRNA的体外定量检测, 结果表明采用MB能够快速地获知该药物对细胞内p53 mRNA表达影响的信息.