化学学报 ›› 2009, Vol. 67 ›› Issue (15): 1797-1802. 上一篇 下一篇
研究论文
刘洪娜a 李 松a,b 刘丽赏b 田 岚a 邓 燕a,b 李智洋a 戴亚斌a 何农跃*,a,b
(a东南大学生物电子学国家重点实验室 南京 210096)
(b湖南工业大学绿色包装与生物纳米技术应用湖南省重点实验室 株洲 412008)
Liu, Hongnaa Li, Song a,b Liu, Lishangb Tian, Lana Deng, Yan a,b
Li, Zhiyanga Dai, Yabina He, Nongyue*,a,b
提出了一种应用磁性颗粒和通用连接子扩增技术(Linker-PCR)的多位点单核苷酸多态性(SNP)分型方法. 该方法首先通过酶切将样本基因组DNA打断, 然后将通用连接子通过T4 DNA连接酶与各个酶切片段连接, 利用生物素标记的通用引物将样本进行全基因组扩增. 扩增后, 将生物素标记的Linker-PCR扩增产物固定到亲合素修饰的磁性颗粒表面, 通过与双色荧光标记的等位基因特异性探针杂交, 对待测位点进行分型. 利用该方法, 我们对10个样本MTHFR基因上的2个SNP位点进行了分型, 分型结果准确、正错配信号比大于3. 由于利用Linker-PCR技术来实现对靶序列的全基因组扩增, 该方法非常适用于大量样本的多基因多位点的SNP分型研究.