利用荧光浓度指示剂fura-2研究稀土离子的跨膜行为

摘要/Abstract

本文提出了利用fura-2测量细胞内游离稀土离子浓度的定量方法。实验结果表明, 在模拟细胞内离子组成的条件下, 稀土离子La^3^+和Y^3^+与fura-2形成1:1的配合物。其配合物的表观离解常数分别为161nmol.dm^-^3和404nmol.dm^-^3,pH7.05, 有未配对f电子的Nd^3^+, Ho^3^+, Sm^3^+, Dy^3^+,Ce^3^+, Yb^3^+等稀土离子对荧光起萃灭作用。此性质使我们能够定性鉴定它们是否进入了细胞。我们使用如上性质, 利用单细胞阳离子测试系统, 以小鼠骨髓瘤细胞为模式细胞, 研究了上游离稀土离子的跨膜行为及部分体内小分子对稀土离子跨膜行为的影响。实验结果支持游离稀土离子不能通过细胞膜的假设, 而且所研究的体内小分子在生理浓度下对稀土离子的跨膜也无明显作用。

关键词: 指示剂, 镧, 钇, 小鼠, 骨髓瘤细胞, FURA-2

Fura-2 was used to monitor RE^3^+ ion trans-membrane behavior. The characterization of RE^3^+-fura-2 interactions in solutions simulating intracellular ionic composition shows that La^3^+ and Y^3^+ form 1:1 RE^3^+-fura-2 complexes. As expected, binding of cations devoid of unpaired electrons (La^3^+ and Y^3^+) to fura-2 is associated with enhanced fluorescence, whereas for cations with unpaired f electrons (Ce^3^+, Nd^3^+, Sm^3^+, Gd^3^+, Eu^3^+, Dy^3^+, Ho^3^+, Yb^3^+) binding to fura-2 associated with decreased fluorescence. These phenomena were used to measure the intracellular free RE^3^+ ions or free RE^3^+ ions with some small molecules. The results support the assumption that RE^3^+ ions can not enter the cytoplasm of living cells and the experimental small molecules are incapable to improve the permeability of RE^3^+ ions.

Key words: CHEMICAL, LANTHANUM, YTTRIUM, MOUSE

中图分类号:

O611.662

引用此文

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